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植物锌指核酸酶(ZFNs)基因编辑
苏州飞凡标准技术服务有限公司可提供锌指核酸酶(Zinc finger nucleases,ZFNs)基因编辑技术。锌指核酸酶是最较早用于基因组编辑的人工合成的限制性内切酶,可实现基因序列的插入、删除或替换。与传统的植物育种技术相比,ZFNs具有较高的精确度,在提高作物品质方面具有广阔的应用前景。
锌指核酸酶包含由锌指蛋白组成的DNA结合域和由具限制性内切酶活性的FokI组成的DNA切割域两部分(图1)。DNA结合域通常是由3 - 4个具有Cys2His2基序的锌指蛋白组成,每个锌指蛋白可通过它的α螺旋特异性地识别三联体碱基。DNA切割域的FokI一般需要以二聚体的形式以非特异性地方式切割DNA,会造成DNA双链断裂(图1)。断裂后的DNA通过非同源末端连接和同源重组修复两种方式进行修复,从而产生核苷酸的插入、缺失、替换或点突变等编辑形式。相对于非同源末端连接,由于修复模板的使用,同源重组修复可实现更精确、更可控的修复。
图 1. 锌指核酸酶(Miller et al., 2007)。
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