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多糖分子量测定

浏览次数:45|来源:飞凡检测 | 2021-11-01 15:03:53

多糖是高分子化合物,其特性及生物活性与紛子級分布密切相关,分子量的大小及期布状况是评价多糖价值、质量控制的重要指标。本公司建立了高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)和凝胶色谱示差多角度激光光散射(GPC-RI-MALS法)分子量检测分析方法,根据原料中多糖特性和测试目的,选择多糖分子及其分子分布测定方法,用于多糖质控或者判断多糖均一性。

(1)效凝胶渗透色谱法( HPGPC )子检测分析:以不同分子的右旋糖酐为标准品,采用HPGPC法,使用高效凝胶渗透色谱串联柱,差检测器检测,采用GPC软件对结果进行分析,以标准品相对分子质量的对数值为纵坐标,以相应色谱峰的保留时间为横坐标进行线性回归,得回归方程,技术峰位分子量(Mp)、重均分子量( Mw )和数均分子量( Mn )以及分子量分布指数D ( MwMn) , 用于测定多糖分子和检测多糖纯度。

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(2)凝胶色谱槎多角度激光光散射( GPC-RIMALS法)分子量检测分析:测得大分子绝对分子量、分子旋转半径以及分子分布等,还可获得多糖的聚集状态信息(棒状、无规则线团或球形) , 具色谱法和光散射法优点。在不用标准品作校正曲线情况下,便可直接测定高分子物质,能快速、准确地测出高分子物质的绝对重均分子量(Mw)、数均分子量(Mn)、Z均分子量(Mz)、分子量分布及分子的分支、聚集态等。

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